Отправлено: 14.10.10 07:20. Заголовок: Исскуственное осеменение.Получение спермы у к..

Получение спермы у кобелей



У кобелей сперму получают способом мастурбации, электроэякуляции и с помощью искусственной вагины.

1. Получение спермы методом мастурбации

Для этого после легкого массажа через препуций пенис выводится дальше пещеристого тела, обхватывается пальцами под пещеристым телом кольцеобразно и ритмично сдавливается. После эрекции кобель может выполнять тазом энергичные поисковые и фрикционные движения. После наступления полной эрекции кобель начинает переворачиваться, что соответствует фазе склещивания, которая должна длиться 10-15 минут. Склещивание имитируют также тем, что одну из тазовых конечностей поднимают на руку, проводящую мастурбацию.

Ассистент обычно находится справа от собаки (если он правша). Суку в охоте фиксируют за шею и голову. При попытке кобеля сделать садку, ассистент правой рукой фиксирует половой член через препуций (крайнюю плоть). Рукой двигают крайнюю плоть вперед-назад, затем, при возникновении эрекции препуций оттягивают к основанию полового члена, чтобы из препуция показались луковицы полового члена. Затем тело полового члена пережимают у основания луковиц полового члена, после чего начинается эякуляция и сперму собирают в подготовленную емкость (спермоприемник).

Способ считается менее физиологичным, чем получение на искусственную вагину (ИВ).

2. Получение спермы с помощью искусственной вагины (ИВ)

ИВ для кобеля можно изготовить самостоятельно. Материалом для корпуса могут быть прочное термостойкое стекло, жесткая резина, пластмасса, полимерные материалы, легкие металлы. Для внутренней камеры используют резиновую камеру ИВ для барана.

Сперму от кобеля получают по общепринятой методике. Заготавливать сперму от кобелей возможно 2-3 раза в течение недели. Предварительно внутреннюю полость резиновой камеры дезинфицируют тампонами, смоченными в 70 градусном спирте, а спермоприемник – кипячением. После дезинфекции резиновую камеру слегка смазывают стерильным разбавителем. Через кран между камерой и корпусом заливают горячую воду, а к узкому концу ИВ присоединяют спермоприемник. Температура в ИВ должна быть 41оС, для этого в камеру заливают 250-450 мл воды. Через носик крана подкачивают воздух до смыкания стенок резиновой камеры. Во время получения спермы часть воздуха может быть выпущена.
Сперму от приученного кобеля получают в ИВ в присутствии самки в состоянии охоты. Заранее внутреннюю полость препуциального мешка и волосяной покров снаружи промывают раствором фурациллина (1:5000) и снаружи просушивают стерильными марлевыми салфетками. Под живот подвязывают стерильный фартук с отверстием для пениса. После нескольких фрикций кобеля в ИВ, наступление эрекции, эякуляция всех 3 фракций спермы происходит в первую минуту. ИВ снимают с пениса кобеля до окончания эрекции, поворачивают вертикально, спермоприемником вниз, чтобы вся сперма поступила в спермоприемник.

Далее от ИВ отсоединяют спермоприемник и полученный эякулят оценивают макроскопически (объем, цвет, запах, консистенция) и микроскопически (густота, подвижность, концентрация, наличие патологических спермиев).

ИВ подвергают разборке (неполной) и дезинфекции. Отсоединяют кран и из камеры выливают воду. Полость рабочей резиновой камеры тщательно промывают 3% раствором соды, просушивают и промывают дистиллированной водой. Корпус ИВ протирают тампонами, смоченными 0,02%-ным раствором фурациллина, сушат.

3. Метод электроэякуляции

Метод обеспечивает возможность получения спермы от самцов, от которых по рефлексологически или иным способом невозможно получить сперму.

Используют специальный прибор, имеющий биполярный электрод для введения в прямую кишку. Или используют 2 электрода: один накладывают на шейку мошонки, другой в прямую кишку. Предварительно животному вводят небольшое количество седативных препаратов. Электрические импульсы, вырабатываемые электродом, воздействуют на срамной и наружный семенной нерв и гладкую мускулатуру половых органов. Гладкие мышцы сокращаются, вызывая эякуляцию.
Оптимальные выходные данные прибора: напряжение 16В, частота 50Гц. Подают 7-8 импульсов, продолжительностью 5 секунд с паузами 10 секунд. Сперму собирают в стакан, изготовленный из нетоксичной пластмассы.

 Отправлено: 14.10.10 08:54. Заголовок: М. Г. Миролюбов Иск..

М. Г. Миролюбов
Искусственное осеменение собак (Продолжение 1)
5. ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ СОБАК
Искусственное осеменение - гинекологическая операция, заключающаяся в получении спермы от самца, её оценке, разбавлении и введении в половые органы самки с помощью специальных инструментов.

Преимущества искусственного осеменения:

С помощью метода искусственного осеменения можно решить ряд проблем в собаководстве.

— при использовании замороженной спермы, возможно её накопление от выдающихся производителей и хранение в криобанке в течение многих лет, для использования в будущем;

— использование криоконсервированной спермы позволяет производить её международный обмен без необходимости перевозки самих собак. При этом появляется возможность заказного осеменения сук спермой любого производителя;

— проще выполнять карантинные ограничения, которые препятствуют перемещению животных из одной страны в другую;

— искусственное осеменение позволяет предотвращать возникновение многих заболеваний, передающихся половым путём, так как в состав синтетических разбавителей спермы обязательно вводятся антибиотики, а также исключается половой контакт животных, большинство микробов и вирусов не передается при искусственном осеменении.

Помимо этого, искусственное осеменение может также рекомендоваться в ряде случаев:

— невозможность естественной случки вследствие узкого и короткого влагалища у сук;

— чрезмерно агрессивное поведение животных во время случки;

— низкая эффективность естественного спаривания вследствие определенных породных особенностей собак (очень крупные и тяжёлые породы и т. д.);

— наличие определённых заболеваний у кобеля или суки, не позволяющих производить полноценную случку (заболевание конечностей, бедра, спины и т. д.).



6. МЕТОДЫ ПОЛУЧЕНИЯ СПЕРМЫ


У кобелей сперму получают способом мастурбации, на искусственную вагину и с помощью электроэякуляции.



Получение спермы методом мастурбации


Сперму от собак можно получать способом мастурбации. Для этого после легкого массажа через препуций пенис выводится дальше пещеристого тела, обхватывается пальцами под пещеристым телом кольцеобразно и ритмично сдавливается. После эрекции кобель может выполнять тазом энергичные поисковые и фрикционные движения. После наступления полной эрекции кобель начинает переворачиваться, что соответствует фазе склещивания, которая должна длиться 10—15 минут. Склещивание имитируют также тем, что одну из тазовых конечностей поднимают на руку, проводящую мастурбацию.

Ассистент обычно находится справа от собаки (если он правша). Суку в охоте фиксируют за шею и голову. При попытке кобеля сделать садку, ассистент правой рукой фиксирует половой член через препуций (крайнюю плоть). Рукой двигают крайнюю плоть вперед-назад, затем, при возникновении эрекции препуций оттягивают к основанию полового члена, чтобы из препуция показались луковицы полового члена. Затем тело полового члена пережимают у основания луковиц полового члена, после чего начинается эякуляция и сперму собирают в подготовленные ёмкости (спермоприёмники).

Способ считается менее физиологичным, чем получение на искусственную вагину.



Получение спермы с помощью искусственной вагины


Искусственные вагины для кобеля были сконструированы: Amantea, 1914 г. (грушевидная вагина без спермоприёмника); Bonadorma, 1940 г. (цилиндрическая вагина); Наггор, 1954 г. (цилиндрическая вагина с ампуловидным одностенным спермоприёмником и шаром для воздуха).

Миролюбивым М.Г., Волковым А.Н., в 1993 г. сконструирован образец искусственной вагины для кобелей массой тела 20—40 кг (служебные овчарки). Она состоит из жёсткого корпуса 1, резиновой камеры 2, капилляра, диаметром 5 мм с краном 3 в корпусе, в котором есть специальный носик 4, отверстия для заливки воды 5, пробки 6, и, спермоприёмника 7, объёмом 30 мл






Искусственную вагину для кобеля можно изготовить в условиях мастерской средней оснащённости. Материалом для корпуса могут быть прочное термостойкое стекло, жесткая резина, пластмасса, полимерные материалы, лёгкие металлы. Для внутренней камеры используют резиновую камеру от искусственной вагины для барана.

Сперму от кобеля получают по общепринятой методике. Заготавливать сперму от кобелей возможно 2—3 раза в течение недели. Предварительно внутреннюю полость резиновой камеры дезинфицируют тампонами, смоченными в 70 градусном спирте, а спермоприёмник — кипячением. После дезинфекции резиновую камеру слегка смазывают стерильным разбавителем. Через кран между камерой и корпусом заливают горячую воду, а к узкому концу вагины присоединяют спермоприёмник. Температура в вагине должна быть 41°С, для этого в камеру заливают 250—450 мл воды. Через носик крана подкачивают воздух до смыкания стенок резиновой камеры. Во время получения спермы часть воздуха может быть выпущена.

Сперму от приученного кобеля получают на искусственную вагину в присутствии самки в состоянии охоты. Заранее внутреннюю полость препуциального мешка и волосяной покров снаружи промывают раствором фурацилина (1:5000) и снаружи просушивают стерильными марлевыми салфетками. Под живот подвязывают стерильный фартук с отверстием для пениса. После нескольких фрикций кобеля в вагину, наступление эрекции, эякуляция всех трех фракций спермы происходит в первую минуту. Искусственную вагину снимают с пениса кобеля до окончания эрекции, поворачивают вертикально, спермоприёмником вниз, чтобы вся сперма поступила в спермоприёмник.

Далее от вагины отсоединяют спермоприёмник и полученный эякулят оценивают макроскопически (объём, цвет, запах, консистенция) и микроскопически (густота, подвижность, концентрация, наличие патологических спермиев).

Искусственную вагину подвергают разборке (неполной) и дезинфекции. Отсоединяют кран и из камеры выливают воду. Полость рабочей резиновой камеры тщательно промывают 3%-ным раствором соды, просушивают и промывают дистиллированной водой. Корпус вагины протирают тампонами, смоченными 0,02%-ным раствором фурацилина. Вагину просушивают и хранят в шкафу.



Метод электроэякуляции


Метод обеспечивает возможность получения спермы от самцов, от которых по рефлексологическим или иным причинам невозможно получить сперму другими способами.

Используют прибор для электроэякуляции. Прибор имеет биполярный электрод для введения в прямую кишку. Или используют два электрода: один накладывают на шейку мошонки, другой в прямую кишку. Предварительно животному вводят небольшое количество седативных препаратов. Электрические импульсы, вырабатываемые электродом, воздействуют на срамной и наружный семенной нерв и гладкую мускулатуру половых органов. Гладкие мышцы сокращаются, вызывая эякуляцию. Оптимальные выходные данные прибора: напряжение 16 в, частота 50 Гц. Подают 7—8 импульсов продолжительностью 5 секунд с 10-ти секундными паузами.

Сперму собирают в пластиковый стакан, сделанный из нетоксичной пластмассы. Сперма при эякуляции поступает фракциями. Первая фракция — секрет уретры, прозрачного цвета. Вторая фракция — собственно сперма, белого цвета, по возможности её собирают в отдельный стакан. Третья фракция — секрет простаты — её также собирают в отдельную ёмкость.



7. ОЦЕНКА СВЕЖЕПОЛУЧЕННОЙ СПЕРМЫ


Объём эякулята. Измеряется с помощью градуированного спермоприёмника. Объём первой фракции обычно составляет 0,2—2 мл, второй фракции 0,5—3 мл, третьей фракции — 15—20 мл (эту фракцию обычно не используют).

Цвет эякулята. Первая фракция — прозрачная или может быть с примесью мочи и клеток уретрального канала. Вторая фракция — непрозрачная, белого или кремового цвета. Третья фракция обычно прозрачна. При любом изменении окраски сперма непригодна для дальнейшего использования.

Концентрация спермиев. Считают с помощью стандартных методик в счётной камере. Норма — 300—800 млн в 1 мл.

Общее количество спермиев. 300—1000 млн в эякуляте.

Активность (подвижность). Каплю спермы исследуют на предметном стекле на обогревательном столике Морозова при температуре 37°С. Накрывают тёплым покровным стеклом. Норма — 7 баллов и более, то есть более 70% спермиев имеют прямолинейное поступательное движение.

Подсчёт живых спермиев. Используют общепринятые методики, заключающиеся в смешивании спермы с красителями (чаще с эозином или нигрозин-эозином). Головки мёртвых спермиев хорошо окрашиваются красителем, головки живых — не окрашиваются. В пробе должно содержаться не более 20% мёртвых спермиев.



8. РАЗБАВЛЕНИЕ И ХРАНЕНИЕ СПЕРМЫ


На сегодняшний день существуют следующие методы хранения спермы:



1. Кратковременное хранение при комнатной температуре в течение не более 4-х часов. Используется как разбавленная, так и неразбавленная сперма. Разбавляют сперму пастеризованным молоком 1:8. При осеменении свежеполученной спермой, получают результаты оплодотворяемости, сравнимые с естественной случкой. Процент положительных результатов — около 85%, практически, как при естественном осеменении.

2. Хранение при температуре +5°С

Эякулят сразупосле получения и оценки, разбавляют специальной синтетической средой и сохраняют в охлажденном до +5°С состоянии (в обычном холодильнике) в течение 2—4 суток. Это позволяет транспортировать сперму.

В качестве разбавителя используют различные среды, в состав которые входят вещества, оказывающие защитное влияние на половые клетки.

Разбавители по Шетцу:

1) сухой порошок молока — 10,0; желток куриного яйца 10,0: вода дистиллированная — до 100,0.

2) 2%-ный раствор глицерина с желтком.

3) 5—6%-ная глюкоза или фруктоза с желтком.

4) 3%-ный натрий-цитрат с желтком.

Разбавитель по Баутиной Е.П.: гликокол — 1,82; цитрат натрия — 0,72; желток куриного яйца 5,0; вода дистиллированная до 100,0.

Процедура осеменения собак охлажденной спермой аналогична таковой при использовании свежеполученной спермы, но перед введением в половые пути суки подогревают дозу спермы в водяной бане.

В случае применения высококачественных разбавителей и проведения осеменения в оптимальное по отношению к овуляции время, возможно, получать от охлажденной спермы высокую (75—80%) оплодотворяемость. Но обычно результативность осеменения охлажденной спермой на 20% ниже, по сравнению с использованием свежеполученной спермы.

3. Хранение в жидком азоте (-196°C )

Метод предусматривает использование замороженной в жидком азоте спермы. Срок годности спермы практически не ограничен.

При использовании для искусственного осеменения замороженной спермы, необходимо соблюдать определенные зооветеринарные требования.

Центры по криоконсервации спермы собак работают во многих странах мира и используют практически одинаковые методы её замораживания, но при этом применяют различные синтетические разбавители, в том числе и патентованные.

Сперму кобелей обычно замораживают в виде гранул объёмом 0,2 мл или в полипропиленовых соломинках объемом 0,25 мл. Преимуществами замораживания спермы в соломинках являются лучшие условия стерильности и возможность их маркировки данными о производителе: порода, кличка, дата взятия семени и т. д.

Оттаивают сперму, замороженную в гранулах, при 37°С в изотонических растворах, а соломинки — в водяной бане при 35—37°С.

При использовании замороженной спермы на оплодотворяемость сук оказывают влияние многие факторы: состав синтетической среды, качество спермы, температура ее оттаивания, число биологически полноценных спермиев в дозе, время осеменения, техника осеменения и место введения спермы в половые пути суки.

В дозе спермы перед замораживанием должно содержаться не менее 150—200 млн подвижных спермиев.

Сразу после получения и оценки, эякулят разбавляют в 2—3 раза специальным криозащитным разбавителем, содержащим различные вещества, предохраняющие спермии от повреждений во время замораживания. В частности, в их состав обязательно входят глицерин и желток куриного яйца.

Состав разбавителя:

ТРИС 6,06 гр; фруктоза 2,5 гр: лимонная кислота 3,4 гр; дистиллированная вода 184 гр; глицерин 8 гр; желток 20 гр; трициллин 0,5 гр.

После разбавления сперму охлаждают в холодильнике в течение 2—3 часов до +4°С, а затем замораживают с использованием жидкого азота до температуры -196°С.

При хранении замороженной спермы в жидком азоте (в сосуде Дьюара), она способна сохранять биологическую полноценность в течение многих десятков лет.

Поскольку, в процессе замораживания-оттаивания разрушается до 50%спермиев, желательно вводить дозу непосредственно в полость матки. Процент положительных результатов до 60%.



9. ВЫБОР ОПТИМАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ ДЛЯ ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНЕНИЯ


Причиной бесплодия часто бывает неправильный выбор времени искус венного осеменения.

По клиническим проявлениям. От появления у суки первых коровянистых выделений искусственное осеменение проводят на 11 — 14 день двукратно с интервалом 48 часов, с учетом феномена охоты (на 3—4 день от начала охоты). Также учитывают отёк вульвы — примерно, через четыре дня от начала уменьшения отёка.

Цитологическое исследование влагалищного мазка. Мазок берут с верхнего свода влагалища, окрашивается любым известным способом. Случка проводится в момент, когда более 60% эпителиальных клеток являются безъядерными и в мазке отсутствуют полиморфно-ядерные лейкоциты.

Эндоскопическое исследование. Искусственное осеменение проводят в период, когда уменьшается отёчность продольных складок влагалища, количество вторичных складок уменьшается и они становятся бледными.

Измерение уровня гормонов. Определяют с помощью ИФА. Искусственное осеменение проводят между 4-м и 6-м днём, после того как концентрация прогестерона в плазме превысит 2 нг/мл.



10. МЕТОДЫ ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНЕНИЯ




Влагалищное осеменение


Инструменты: пластиковый шприц с полужёстким катетером, длиной до 30 см.

Сперму набирают на всю длину катетера (в цилиндр набирать нельзя из-за небольшого объёма спермы, но в нём должен быть достаточные объём воздуха для проталкивания дозы спермы из катетера во влагалище).

После санитарной обработки наружных половых органов катетер вводят во влагалище, при возможности проводят пальпацию катетера и шейки матки через брюшную стенку. Суку приподнимают за задние конечности и опустошают катетер, прогоняя через катетер воздух из шприца.

Рекомендуется проводить пальпаторную стимуляцию клитора в течение 1 -2 минут, так как это вызывает антиперистальтические сокращения влагалища и матки, засасывающие сперму в матку.



Внутриматочное осеменение


Ввести обычный катетер через шейку матки трудно и не всегда возможно, так как влагалище очень узкое (0,8—2 см в диаметре) и длинное (до 20 см), шейка имеет выпячивающуюся влагалищную часть, из-за чего образуются слепые карманы. Поэтому применяют специальные методики и специальные инструменты.



Осеменение катетером Фоли


Классический катетер Фоли имеет на конце рабочей (влагалищной части) баллончик из тонкостенной резины, который при заполнении воздухом раздувается и не дает сперме вытечь из краниальной части влагалища. Баллончик имеет отверстие для второго обычного катетера, который продвигают ближе к шейке матки, изливая на шейку матки сперму. После введения спермы второй катетер втягивают в катетер Фоли, тем самым предотвращая утечку спермы вокруг отверстий катетера. Оба катетера оставляют во влагалище самки на 15 минут.



Осеменение при помощи норвежского катетера (Д. Фогнер)


Норвежский катетер состоит из наружного пластикового катетера и внутреннего — металлического с расширенным и закругленным концом.

Наружный пластиковый катетер вставляется во влагалище суки на уровне шейки матки. Шейку матки пальпируют через брюшную стенку и оттягивают краниально, чтобы сгладить влагалищную часть шейки матки и, внутренний катетер можно было бы ввести через цервикальный канал.

Методика требует большой практики.



Осеменение при помощи эндоскопа


Необходим жесткий эндоскоп с выдвигающимся катетером. Эндоскоп продвигают до шейки матки, отыскивают отверстие шейки матки и вставляют катетер.



Хирургическая методика


Под общим наркозом производится лапаротомия по средней линии живота, тело матки выводят в разрез. С помощью иглы вводят в тело матки внутривенный катетер и сперму через него медленно вводят в матку.

 Отправлено: 14.10.10 13:15. Заголовок: Искусственное осемен..

Искусственное осеменение
Искусственным осеменением называют любой способ, который невозможен без вмешательства человека. Простой забор спермы у кобеля с немедленным введением ее в гениталии суки, часто фигурирующий в лексиконе как «вязка с помощником», на самом деле является искусственным оплодотворением свежей спермой.

Искусственное оплодотворение свежей спермой
К такому методу прибегают, когда вязка не удается по следующим причинам:
• несовпадение темпераментов;
• неопытность одного или обоих партнеров;
• узость путей в гениталиях суки (атрезия петли, нарушения формирования петли или влагалища, пролапс влагалища из-за импрегнации (насыщения) эстрогенами в период течки и т. д.);
• болевая реакция, возникающая у одного из партнеров во время вязки (на уровне позвоночника, задних конечностей, пениса, влагалища);
• недостаток либидо (полового влечения).

Этот метод позволяет также бороться с заболеваниями, передающимися половым путем (герпесвирус, бруцеллез). Искусственное осеменение обеспечивает дополнительную защиту, потому что отсутствие прямого контакта слизистых оболочек гениталий партнеров значительно уменьшает возможность передачи инфекции.

У собак некоторые производители с высокими качественными показателями могут иметь несколько десятков вязок в течение года. Было бы желательно (к сожалению, этого почти не делается), чтобы их владельцы использовали их не иначе, как для искусственного осеменения. В противном случае самец может передавать патогенные микроорганизмы многим сукам и, следовательно, распространять заболевание.

Убедившись, что самка готова принять самца, ветеринарный врач производит у него забор семени в присутствии любой течной самки (не обязательно той, которую намерены осеменять). Забор эякулята происходит таким образом:
• луковица полового члена должна быть выведена из препуциального мешка до начала процедуры забора, чтобы ее увеличение не мешало выведению пениса полностью;
• эректильную луковицу массируют до получения спонтанных движений таза;
• сжатие пениса позади луковицы позволяет поддерживать эрекцию до трех фаз эякуляции.

При необходимости можно провести массаж промежности. Как правило, весь секрет простаты в последней фазе собирать не следует; это нужно делать только у собак крупных пород, так как из-за значительной длины половых органов суки необходимо большее количество спермы.

Полноценную сперму помещают на подогретое стекло под микроскоп и подвергают анализу (подсчитывают количество, оценивают морфологию и подвижность сперматозоидов). Если качество спермы отвечает требованиям, то она с помощью зонда (влагалищный зонд типа «Осирис») вводится во влагалище или в матку (маточный зонд) суки.

После этого необходимо подержать суку за задние лапы в приподнятом положении 10 минут, что позволит обеспечить продвижение сперматозоидов и ограничить их отток. По этой же причине рекомендуется не давать суке мочиться после осеменения в течение нескольких минут.

Следует уточнить, что эти действия надо выполнять со всеми предосторожностями во избежание теплового, механического или химического шокового воздействия на сперматозоиды. При соблюдении вышеперечисленных мер предосторожности технология осеменения свежей спермой позволяет добиться результатов, эквивалентных естественной вязке (около 80 % случаев беременности).

 Отправлено: 14.10.10 13:19. Заголовок: 9. ВЫБОР ОПТИМАЛЬНОГ..

9. ВЫБОР ОПТИМАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ ДЛЯ ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНЕНИЯ

Причиной бесплодия часто бывает неправильный выбор времени искус венного осеменения.
По клиническим проявлениям.От появления у суки первых коровянистых выделений искусственное осеменение проводят на 11 — 14 день двукратно с интервалом 48 часов, с учетом феномена охоты (на 3—4 день от начала охоты). Также учитывают отёк вульвы — примерно, через четыре дня от начала уменьшения отёка.
Цитологическое исследование влагалищного мазка.Мазок берут с верхнего свода влагалища, окрашивается любым известным способом. Случка проводится в момент, когда более 60% эпителиальных клеток являются безъядерными и в мазке отсутствуют полиморфно-ядерные лейкоциты.
Эндоскопическое исследование.Искусственное осеменение проводят в период, когда уменьшается отёчность продольных складок влагалища, количество вторичных складок уменьшается и они становятся бледными.
Измерение уровня гормонов.Определяют с помощью ИФА. Искусственное осеменение проводят между 4-м и 6-м днём, после того как концентрация прогестерона в плазме превысит 2 нг/мл.

10. МЕТОДЫ ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНЕНИЯ

Влагалищное осеменение
Инструменты: пластиковый шприц с полужёстким катетером, длиной до 30 см.
Сперму набирают на всю длину катетера (в цилиндр набирать нельзя из-за небольшого объёма спермы, но в нём должен быть достаточные объём воздуха для проталкивания дозы спермы из катетера во влагалище).
После санитарной обработки наружных половых органов катетер вводят во влагалище, при возможности проводят пальпацию катетера и шейки матки через брюшную стенку. Суку приподнимают за задние конечности и опустошают катетер, прогоняя через катетер воздух из шприца.
Рекомендуется проводить пальпаторную стимуляцию клитора в течение 1 -2 минут, так как это вызывает антиперистальтические сокращения влагалища и матки, засасывающие сперму в матку.

Внутриматочное осеменение
Ввести обычный катетер через шейку матки трудно и не всегда возможно, так как влагалище очень узкое (0,8—2 см в диаметре) и длинное (до 20 см), шейка имеет выпячивающуюся влагалищную часть, из-за чего образуются слепые карманы. Поэтому применяют специальные методики и специальные инструменты.

Осеменение катетером Фоли
Классический катетер Фоли имеет на конце рабочей (влагалищной части) баллончик из тонкостенной резины, который при заполнении воздухом раздувается и не дает сперме вытечь из краниальной части влагалища. Баллончик имеет отверстие для второго обычного катетера, который продвигают ближе к шейке матки, изливая на шейку матки сперму. После введения спермы второй катетер втягивают в катетер Фоли, тем самым предотвращая утечку спермы вокруг отверстий катетера. Оба катетера оставляют во влагалище самки на 15 минут.

Осеменение при помощи норвежского катетера (Д. Фогнер)
Норвежский катетер состоит из наружного пластикового катетера и внутреннего — металлического с расширенным и закругленным концом.
Наружный пластиковый катетер вставляется во влагалище суки на уровне шейки матки. Шейку матки пальпируют через брюшную стенку и оттягивают краниально, чтобы сгладить влагалищную часть шейки матки и, внутренний катетер можно было бы ввести через цервикальный канал.
Методика требует большой практики.

Осеменение при помощи эндоскопа
Необходим жесткий эндоскоп с выдвигающимся катетером. Эндоскоп продвигают до шейки матки, отыскивают отверстие шейки матки и вставляют катетер.

Хирургическая методика
Под общим наркозом производится лапаротомия по средней линии живота, тело матки выводят в разрез. С помощью иглы вводят в тело матки внутривенный катетер и сперму через него медленно вводят в матку.

11. МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ БЕРЕМЕННОСТИ

Клинико-гинекологическое исследование
Примерно через месяц после осеменения при у беременных сук наблюдаются слизистые выделения в небольшом количестве из вульвы.
При пальпации, через месяц после оплодотворения в брюшной полости прощупываются плотные образования, представляющие собой сферические очертания, диаметром 10—20 см.
С 35 дня наблюдается увеличение массы животного, увеличение молочных желёз и сосков, из молочных желез выделяется серозная жидкость, которая оставляет вокруг сосков тёмные, легкосмываемые пятна С 40-го дня заметно увеличение объёма живота. За неделю до родов наблюдаются предвестники родов (животное строит «гнездо», из сосков появляется молозиво, расслабляются связки таза, расслабляется шейка матки, «опускается» живот и др.).
За неделю до родов при осмотре и пальпации брюшной стенки наблюдается движение плодов.
В последних половине и трети беременности при аускультации или с помощью электрокардиографа можно регистрировать сердцебиение плодов. Частота сердечных сокращений обычно вдвое выше, чем у матери.

Рентгенография
Точная диагностика беременности возможна только с 45-го дня, когда начинается окостеневание скелета. На рентгенограмме просматриваются кости плодов. На поздней стадии беременности можно точно подсчитать количество плодов.

Ультразвуковой контроль беременности и бесплодия
Определить результативность искусственного осеменения, дифференциировать беременность от ее ложного проявления и от воспаления матки на сегодняшний день наиболее доступно с помощью ультразвукового исследования.
БЕРЕМЕННОСТЬ.С 15-го дня беременности (в эмбриональную стадию) амниотические полости выявляются как разрозненные округлые эхонегативные структуры, диаметром 1—1,5 см. На 21 день зародыши выявляются в виде эхонегативных сферических образований, диаметром 10—15 мм, с 32 дня определяется голова, туловище, зачатки конечностей. Скелет позвоночника идентифицируется с 40-го дня. С 45-го дня определяются органы плода.
К 50—58 дню беременности количество жидкости в матке резко уменьшается и наличие плодов данным прибором можно установить только по четкообразному строению позвоночника.
Точное количество плодов с помощью ультразвукового исследования из-за артефакта многократного отражения ультразвуковой волны (акустическое зеркало) выявить не удается.
При патологии беременности, возможно диагностировать замедление частоты сердечных сокращений и снижение двигательной активности плода.
При гибели и гнилостном разложении (эмфиземе) плодов в матке определяется газ от жизнедеятельности микроорганизмов, который на сканограммах создает эхогенные зоны с тенями, затрудняющие исследование, так как через газовые среды ультразвуковые волны не проходят.
БЕСПЛОДИЕ.При бесплодии матка и яичники часто не выявляются. Выявить удается рога матки во время течки, так как в полостях рогов имеется ограниченное количество слизи.
Любой воспалительный процесс сопровождается увеличением диаметра рогов матки и заполнение полости воспалительным экссудатом (анэхогенная или гипоэхогенная структура).
При эндометрите выявляется лишь увеличение диаметра матки и незначительный экссудат в полости матки.


Рис. 2. Ультразвуковая картина при пиометре
При пиометре диаметр рогов значительно увеличен, стенки матки неоднородные, повышенной эхогенности; при железисто-кистозной гиперплазии возможна визуализация кист.


Рис. 3. Ультразвуковая картина при беременности
При гидрометре стенки матки часто истончены, поэтому при поперечном разрезе ультразвуковым сканером, имеют не округлую форму, а форму неправильных пчелиных сот.
При пиометре, гидрометре, железисто-кистозной гиперплазии и других аналогичных заболеваниях, сопровождающихся скоплением в полости матки значительного количества патологического экссудата на сканограмме, в поле зрения могут попадать несколько ультразвуковых срезов одного и того же рога матки, так последний может перегибаться несколько раз.

12. САНИТАРНЫЕ ПРАВИЛА ПРИ ИСКУССТВЕННОМ ОСЕМЕНЕНИИ

При проведении искусственного осеменения сук необходимо строго придерживаться ветеринарно-санитарных правил, установленных ветеринарным законодательством, как и при искусственном осеменении самок других животных.
За 4—5 часов до работы проводят генеральную уборку помещения с помощью не пахнущих дезсредств, облучают бактерицидными лампами.
Наружные половые органы животного тщательно обмывают тёплой водой с мылом, орошают тёплым раствором фурацилина (1:5000), после чего насухо вытирают ватным тампоном.
Перед операцией искусственного осеменения необходимо тщательно мыть руки с мылом, спиртом при помощи щётки, а затем обрабатывать их 70%-ным спиртом, ссадины, подногтевые пространства, сгибы суставов пальцев смазывать 5%-ным йодом, затем одевать одноразовые стерильные перчатки.
Инструменты и оборудование до и после использования стерилизуют и хранят, согласно инструкциям, прилагаемых к ним.
По окончании работы также проводят тщательную механическую очистку помещения с последующей дезинфекцией.

13. ПРИЛОЖЕНИЯ

ИНСТРУКЦИЯ РКФ О РЕГИСТРАЦИИ ПОТОМСТВА, ПОЛУЧЕННОГО ОТ ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНЕНИЯ СОБАК

Специалист, занимающийся сбором, замораживанием, хранением. осревогскок спермы н осеменением собак замороженной спермой должен иметь договор о сотрудничестве с РКФ и следовать инструкциям, для предотвращения возможной ошибки при кдентифмкацик и регистрации потомства от искусственного осеменения в РКФ.
При этом должна заполняла определенная документация. Все требуемые записи должны оформляться своевременно: непосредственно во время сбора и криоконсервацкн семешс во время перевогиси семени; в период осеменения суки. При этом все необходимые документы должны быть заполнены последовательно, аккуратно н грамотно. Эти документы должны сохраняться не менее б лет с момента последнего осеменения шморо-женной спермой донора.
1. Документы, заполняемые лицом, производящим взятие и криоконсервацию спермы.
а) Данные о собаке-доноре спермы (племенном производителе).
— Порода.
— Кличка.
— Номер родословной РКФ.
— Дата рождения.
— Окрас.
— Кличка отца и матери. Их регистрационные номера.
— Предоставить в РКФ формуляр «Сведения о замороженной сперме посменного кобеля» сразу после заготовки или сбора спермы.
— Необходимо знать дату перевозки собаки к специалисту для взятия и криоконсервации спермы.
— Должен иметь адрес и фамилию специалиста, производящего заготовку криоковсервированной спермы.
— Обязан иметь сведения о количестве замороженных и заложенных на хранение спермодоз от его кобеля.
— Должен знать месторасположение хранилища, где заложена сперма на хранение.
— Должен знать новое месторасположение, куда перевозят сперму его собаки на хранение.

2. Данные, заполняемые владельцем, при покупке замороженной спермы от собаки-донора.
— Число спермодоз, полученных владельцем.
— Дата перевозки спермы к владельцу.
— Адрес, куда семя перевезено.
— Регистрационный номер и кличка суки, планируемой для искусственного осеменения замороженной спермой.
— Контейнер с замороженным семенем должен иметь четкую маркировку (порода, регистрационный номер и кличка собаки-донора, дата заготовки семени).
_______________________________________________________________________________________
организация, проводившая исследование